Содержание
- Анализ крови на сифилис – RW-методика
- Описание методики
- Катализатор реакции Вассермана, как делают RW анализ
- Как подготовиться к анализу крови RW на сифилис
- Как проводят анализ крови на сифилис, как делают реакцию Вассермана
- Исследование спинномозговой жидкости, что такое, как делают
- Расшифровка результатов анализов
- Степень погрешности, насколько точны результаты анализа на сифилис
Анализ крови на сифилис – RW-методика
RW-анализ крови на сифилис, также известный, как реакция Вассермана, применяется уже более ста лет и не думает сдавать завоеванные позиции. В плане эффективности данная методика, отличающаяся крайней простотой и в то же время высоким уровнем надежности, не имеет себе равных. Все современные тесты, разработанные с целью диагностики сифилиса на ранней стадии развития болезни, в той или иной мере воспроизводят классическую реакцию Вассермана. И все же, как бы производители подобных анализаторов ни старались, полностью заменить изобретение, которое получило широкое распространение по всему миру и спасло миллионы жизней, они пока не могут, а вот дополнить исследование, подтвердить уже полученные данные им вполне под силу.
Описание методики
Что представляет собой RW-анализ?
Поэтапное описание анализа выглядит следующим образом:
- Пациенту вводят препарат с кардиолипином с целью провоцирования РСК.
- Следом за «провокатором» в дело вступает гемолитическая система, запускающая процесс гемолиза.
- Сформировавшиеся комплексы нейтрализуются с помощью комплемента.
Если человек болен сифилисом, в его крови и спинномозговой жидкости сразу же после ввода «провокатора» начинают формироваться соединения «антиген-антитело», которые без проблем идентифицируются специалистами-лаборантами. Процесс прекращается тогда, когда иссякает кардиолипин, который вводят в строго ограниченном объеме. Далее в дело вступает комплемент, обезвреживающий образовавшиеся соединения. После того, как данное вещество выполнит свою задачу, специалисты, проводящие исследование, заполняют таблицу, где указывают, с какой скоростью протекала РСК и сколько комплексов образовалось за отведенный промежуток времени. Интенсивность реакции оценивается по шкале от (+) до (++++). От полученных результатов зависит, как и чем будут лечить пациента и то, сколько времени это займет.
Если человек здоров, кардиолипин нейтрализуется еще на стадии введения гемолитической системы. Ввиду отсутствия в крови и спинномозговой жидкости пациента специфических антител, введенный ранее антиген не образует комплексы, а вступает в реакцию гемолиза, вследствие чего его активность довольно быстро сходит на нет.
Катализатор реакции Вассермана, как делают RW анализ
В роли катализатора реакции Вассермана выступает препарат, в состав которого входят три вещества:
- Антиген бледной трепонемы, получаемый путем обработки возбудителя болезни ультразвуком либо посредством многоуровневой очистки спиртового липидного экстракта, извлеченного из мышечных волокон бычьего сердца (во втором случае к антигену добавляют лецитин, фосфолипид и холестерин, призванные усилить реакцию).
- Гемолитическая система на основе гемолитической сыворотки из крови кролика и осла, иммунизированной эритроцитами барана в возрасте от одного года до четырех лет.
- Комплемент, изготовленный из кровяной сыворотки морских свинок.
Указанные компоненты смешиваются в равном количестве (по двадцать пять или пятьдесят миллилитров), после чего готовый препарат используют по назначению.
Как подготовиться к анализу крови RW на сифилис
При наличии следующих обстоятельств забор крови не осуществляется:
- повышенная температура тела;
- критические дни;
- период восстановления после недавно перенесенной болезни инфекционного характера;
- предстоящие роды и послеродовый период;
- употребление алкоголя накануне процедуры;
- возраст ребенка менее двух недель.
При отсутствии противопоказаний забор крови осуществляется в плановом режиме. Из полученного материала изготавливают сыворотку, которую затем используют для анализа. Происходит это следующим образом:
- Извлеченную из вены пациента кровь помещают в термостат, внутри которого поддерживается температура в 37 ºС.
- Когда кровь загустеет (данный процесс занимает от пятнадцати минут до получаса), в дело вступает центрифуга, совершающая около тысячи оборотов в минуту.
- Примерно через пятнадцать минут непрерывной работы центрифуги над кровяным сгустком появляется прозрачная жидкость – кровяная сыворотка – которую извлекают для дальнейших исследований. Если в сыворотке обнаруживаются эритроциты, жидкость помещают обратно в центрифугу.
- Очищенная от эритроцитов сыворотка инактивируется при температуре 55-57 ºС (данный процесс занимает в среднем полчаса).
Инактивированную сыворотку, лишенную естественного комплемента, используют по назначению либо помещают в холодильник, где она хранится несколько дней (но не более недели).
Как проводят анализ крови на сифилис, как делают реакцию Вассермана
Исследование крови на сифилис осуществляется следующим образом:
- Три пробирки заполняют кровяной сывороткой, разбавленной раствором натрия хлорида.
- В первую пробирку добавляют двадцать пять миллилитров антигена, во вторую – аналогичное количество кардиолипина, в третью (контрольную) доливают раствор хлорида натрия.
- Во все пробирки добавляют комплемент.
Чтобы результаты анализа оказались максимально точными, заранее компоненты не смешивают. Далее происходит следующее:
- Пробирки помещают в термостат, поддерживающий температуру 36-38 ºС (первичная инкубация).
- Через сорок-пятьдесят минут в подогретую жидкость вводят гемолитический состав в объеме, не превышающем пяти миллилитров, после чего интенсивно встряхивают пробирки.
- Сосуды помещают обратно в термостат.
После введения гемолитической системы в пробирках начинается реакция, за которой внимательно следят специалисты-лаборанты. Окончательный вердикт выносится после сравнения полученных данных с контрольными образцами – дополнительными пробирками, одна из которых заполнена кровью, инфицированной бледной трепонемой, а другая – чистой кровью.
Исследование спинномозговой жидкости, что такое, как делают
RW-методика допускает использование вместо крови спинномозговой жидкости, которую также разливают по трем пробиркам: в первую наливают неразбавленную субстанцию, во-вторую – смешанные в равных пропорциях спинномозговой состав и раствор хлорида натрия, в третью – жидкость, разведенную раствором хлорида натрия в соотношении 1:5. Дальнейшие действия уже известны: что кровь, что спинномозговая жидкость подвергаются одним и тем же манипуляциям, которые были подробно описаны в предыдущем разделе статьи.
Расшифровка результатов анализов
Об отсутствии в крови возбудителей болезни свидетельствует реакция гемолиза, начавшаяся сразу же после введения в состав гемолитической системы. Подобный результат говорит о том, что в крови пациента нет антител к бледной трепонеме, следовательно, человек полностью здоров.
Если же реакция гемолиза началась с задержкой либо полностью отсутствует, значит, заражение все-таки произошло. В этом случае стадия болезни и степень ее проявления оцениваются, исходя из следующих показателей:
- (+) – начальная стадия болезни (признак – незначительная задержка в реакции гемолиза);
- (++) – легкая форма болезни (признак – слабоположительная реакция или частичная задержка гемолиза);
- (+++) – прогрессирующая форма болезни (признак – положительная реакция или продолжительная пауза перед началом гемолиза);
- (++++) – тяжелая (запущенная) форма болезни (признак – резко положительная реакция или полное отсутствие гемолиза).
Иногда в медицинском заключении указывается так называемая сомнительная реакция, обозначаемая в виде (+/-). Наличие подобной отметки говорит о том, что результаты анализа оказались неточными, поэтому желательно его повторить через какое-то время.
Степень погрешности, насколько точны результаты анализа на сифилис
В подавляющем большинстве случаев возникновение ложноположительной реакции оказывается обусловлено:
- употреблением спиртных напитков или жирной пищи накануне или в день забора крови на анализ;
- беременностью;
- наличием туберкулеза или патологии соединительных тканей системного характера;
- воспалением легких;
- злокачественным процессом, протекающим в организме;
- проблемами с печенью;
- малярией;
- наличием в организме паразитов;
- скарлатиной;
- высоким уровнем сахара в крови;
- брюшным тифом;
- лептоспирозом;
- критическими днями.
В случае выявления одного из указанных факторов, влияющих на результаты исследования, рекомендована повторная сдача анализа. Также процедуру следует повторить тем, кто после прохождения курса лечения столкнулся с таким явлением, как синдром серорезистентного сифилиса, проявляющийся в виде отрицательной реакции Вассермана при фактическом наличии в крови антител к бледной трепонеме.
Дополнительное обследование. В случае если результаты RW-анализа оказались неточными, специалисты советуют прибегнуть к усовершенствованному аналогу реакции Вассермана – тесту RPR, дополненному трепонемными тестами РПГА. Этот вид исследования, быстро набирающий популярность, отличается довольно высокой точностью. В качестве единственно верного источника информации его рассматривать, конечно, нельзя, а вот в качестве дополнительного – не только можно, но и нужно.
Источник: womanchoise.ru